我院藥劑科何勇教授團(tuán)隊(duì)在治療藥物監(jiān)測學(xué)科建設(shè)方面取得階段性成果
我院藥劑科何勇教授團(tuán)隊(duì)在治療藥物監(jiān)測學(xué)科建設(shè)方面取得階段性成果,研究成果“Fluorescent immunochromatographic test strip for therapeutic drug monitoring of methotrexate with high sensitivity and wide dynamic range”在國際期刊《Microchimica Acta》(IF 5.7)以O(shè)riginal research發(fā)表。
時(shí)間分辨熒光微球免疫層析法是一種將時(shí)間分辨熒光技術(shù)應(yīng)用于免疫分析的新型檢測方法,目前是與化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)發(fā)光并駕齊驅(qū)的三種超敏免疫分析方法之一。本研究采用新型時(shí)間分辨熒光微球(TRFMs)作為標(biāo)記物,每個(gè)TRFM中可包裹成千上萬個(gè)鑭系熒光分子,其具有242 nm的Stoke位移和窄的發(fā)射峰,有效消除了激發(fā)光和檢測物中各種非特異性熒光的干擾。TRFMs的熒光半衰期長達(dá)10~2000 μs,是傳統(tǒng)熒光的103~106倍,不僅大大提高了標(biāo)記效率,且能夠通過時(shí)間分辨來降低本底熒光,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)高信噪比。此外,TRFM表面修飾有合適密度的羧基,用于與甲氨蝶呤(MTX)單克隆抗體的共價(jià)偶聯(lián),提高了標(biāo)記物的穩(wěn)定性。以該復(fù)合物溶液為信號(hào)探針制備熒光免疫層析試紙條。TRFM解決了傳統(tǒng)標(biāo)記材料(熒光染料、金納米等)的不穩(wěn)定、易受環(huán)境干擾、發(fā)光效率低等問題,提高了檢測的特異性與靈敏度,靈敏度可達(dá)10-12 g/mL。采用競爭性免疫分析方法,在肉眼觀察和輔助儀器檢測的雙重檢測模式下,建立了一種快速檢測MTX的熒光免疫層析試紙條。本文建立的MTX檢測可在7分鐘內(nèi)獲得結(jié)果,線性范圍是10 pM - 10 μM,檢測限為3.33 pM。在檢測人血清、尿液和牛奶時(shí),加標(biāo)回收率為94.0% - 110.0%。與臨床常用的EMIT方法對(duì)比,F(xiàn)ITS檢測患者臨床血清樣品的相關(guān)系數(shù)為0.999,兩種方法獲得的結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著性差異。本文建立的快速監(jiān)測MTX的高靈敏和寬檢測范圍的FITS,大大地縮短了檢測時(shí)間,解決了取樣時(shí)間和獲取報(bào)告時(shí)間差的難題,有望為降低MTX的毒副作用和嚴(yán)重不良事件提供技術(shù)支撐。
文章的第一作者和通訊作者分別是我院二年級(jí)研究生朱中潔和何勇教授,第一作者和通訊作者單位均是遵義醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院藥劑科。文章受國家自然科學(xué)基金(21964023)資助。(供稿:藥劑科,審核:一審胡欽、二審陳檉、三審楊易)
文章鏈接:https://link.springer.com/article/10.1007/s00604-023-05917-6
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